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      考馬斯亮藍(lán)快速染色液 使用說明書
      更新時間:2016-07-01   點(diǎn)擊次數(shù):7853次

       

      考馬斯亮藍(lán)快速染色液

      產(chǎn)品簡介:

      考馬斯亮藍(lán)快速染色液(Commassie Blue Fast staining solution)是以考馬斯亮藍(lán)G250為染料可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳膠的快速染色,亦可用于Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測。

      NobleRyder考馬斯亮藍(lán)快速染色液采用NobleRyder自主研發(fā)的技術(shù),在傳統(tǒng)考馬斯亮藍(lán)快速染色液的基礎(chǔ)上進(jìn)行改良,是一種無毒的染色液,快速染色液只需1h,可以檢測低達(dá)100ng的蛋白電泳條帶。其核心優(yōu)點(diǎn)在于:無需對凝膠進(jìn)行固定,無需煮沸,無需脫色,染色時間短,操作更加簡單。

      產(chǎn)品組成:

      編號

      名稱

      P2813

      100ml

      P2813

      500ml

      Storage

      考馬斯亮藍(lán)快速染色液

      100ml

      500ml

      RT 避光

      使用說明書

      1

       

      自備材料:

      1、水平搖床或側(cè)擺搖床

      2、蒸餾水

      3、(可選)加熱裝置

      4、20%甘油水溶液

       

      操作步驟(僅供參考):

      1、PAGE電泳結(jié)束后取凝膠放入約50~100ml蒸餾水中,在搖床上搖動5min,棄液,重復(fù)上述步驟1次。

      2、棄蒸餾水,加入3~5倍體積以上的Commassie Blue Fast staining solution,使染色液能蓋住凝膠。

      3、(可選)凝膠置于考馬斯亮藍(lán)快速染色液中,在水浴鍋或微波爐內(nèi)加熱至95~100℃,立即從加熱裝置中取出。(此步驟可以使染色提高靈敏度或加快染色進(jìn)程,亦可省略。)

      4、在搖床上搖動染色,蛋白量大的條帶10~15min左右會出現(xiàn),大部分蛋白條帶會在30~60min 左右出現(xiàn)。一般情況下,5h能獲得效果。

      5、出現(xiàn)清晰的目標(biāo)蛋白條帶即可停止染色,棄染色液。

      6、加入適量的蒸餾水停止染色反應(yīng)。亦可以在搖床上搖動脫色5~10min,以便減少背景干擾。

      7、把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含20%甘油水溶液中,長期保存可以制備干膠。

       

      注意事項(xiàng):

      1、PAGE電泳后凝膠采用蒸餾水清洗的目的在于去除凝膠中的SDS等干擾物質(zhì)。如果不能充分去除SDS會導(dǎo)致背景較高。如果凝膠很厚,洗滌時間應(yīng)適當(dāng)延長、洗滌次數(shù)應(yīng)適當(dāng)增加。蒸餾水洗滌去除凝膠中的雜質(zhì)時,如果使用經(jīng)過加熱或沸騰的蒸餾水,每次洗滌時間可以縮短至 1~2min。

      2、染色時如果把凝膠和染色液一起放置在微波爐中適當(dāng)加熱,可以大大加快染色速度。但加熱時宜盡量避免沸騰,以免出現(xiàn)因暴沸而導(dǎo)致的凝膠碎裂。

      3、如果希望染色的背景更低,希望獲得更加清晰的蛋白條帶,可以加入適量的室溫蒸餾水進(jìn)行洗滌。通過蒸餾水洗滌可以進(jìn)一步降低背景。在4℃蒸餾水中浸泡一段時間可以獲得背景更低,條帶更清晰的條帶。在次日對4℃蒸餾水浸泡一段時間的已經(jīng)進(jìn)行了染色的凝膠再同前一天一樣進(jìn)行染色和洗滌可以進(jìn)一步改善染色效果,獲得更好的染色蛋白條帶。

      4、本染色液呈酸性,有輕微腐蝕性,使用時請作必要防護(hù)。

      5、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

       

      常見問題:

      1、無染色條帶:可能上樣量太少,建議電泳時加適當(dāng)量的BSA等作為陽性對照。

      2、背景太高:可能雜質(zhì)沒有除盡,建議延長zui初的蒸餾水洗滌時間或增加洗滌次數(shù)。也可以在完成染色后,把凝膠放置在蒸餾水中在室溫或4℃進(jìn)行洗滌。在4℃蒸餾水中浸泡一段時間,通常可以取得較好的脫色效果。

      3、染色條帶的靈敏度不夠理想:可以使用考馬斯亮藍(lán)快速染色液進(jìn)行重復(fù)染色,重復(fù)染色可以改善染色效果。在加熱情況下染色可以顯著提高檢測靈敏度,另外染色后在室溫或4℃用蒸餾水進(jìn)行脫色也可以顯著改善染色的靈敏度。

       

      有效期:12個月有效。

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